miRNA/ circRNA/ LncRNA 细胞功能学实验
服务简介:
非编码RNA家族的重要成员以多种方式调节生命活动,包括转录调节、转录后调节、翻译调节、蛋白质定位等。对其功能和机制的系统研究有助于我们更全面、更深入地理解基因表达调控机制和生物的生命活动。
miRNA、circRNA 和 lncRNA 的细胞功能学实验,基本都先是靶基因预测和验证,然后看是否有增殖、凋亡、再生和调控某些信号通路之类,然后进行转基因验证。
服务流程:
(1)检测目的分子(miRNA、lncRNA 或circRNA)的表达水平
(2)靶基因预测:miRNA(Targetscan,Pictar),circRNA(CircInteractome),lncRNA(miRDB)
(3)验证是否存在靶定作用(双荧光素酶实验)
(4)构建过表达/敲降质粒,转染进目的细胞,进行一系列验证
① 增殖相关:MTT/CCK-8,Brdu,Ki67免疫荧光,生长曲线,集落形成
② 转移和侵袭相关:划痕,transwell侵袭和transwell迁移
③ 凋亡相关:流式细胞术,tunel,Western blot检测凋亡相关蛋白
④ 血管形成实验
⑤ 分子生物学与蛋白实验
⑥ Western blot检测下游通路的变化/Co-IP/RNA pull down/RIP/免疫荧光/ROS检测/线粒体膜电位/钙离子浓度检测
(5)挽救实验
说明:
(1)服务周期:10-60工作日
(2)客户需提供待检测miRNA/circRNA/LncRNA,目标疾病模型
(3)客户需提供实验中所需抗体(或委托我公司代购)
(4)如选择试剂盒检测,请提供相关试剂盒(或委托我公司代购)
(5)如有测序结果,请提供
费用标准:询价
交付结果:
(1)原始实验结果及相关结果分析
(2)具体试验流程(包括实验步骤、主要仪器及试剂说明等)
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